全自动组织研磨机破碎酵母细胞实验-上海净信

实验地点：中科院生物物理所生物大分子国家重点实验室

用户：常文瑞组

实验方法

1、破碎前的准备：

   0.1g菌体（本实验以0.1g菌体为例）；

   直径3号陶瓷珠；

   研磨机（选用品牌上海净信科技TS-24）；

   预处理好的2ML研磨管；

   模块冷冻。
 

2、研磨： 

   0.1g菌体，5000r/min离心1 min后去上清，加入等体积的玻璃珠，加入0.5ML PBS溶液，放入预先冷冻好的模块中，放入上海净信科技的研磨机中，调整频率为60Hz，震荡时间60s.

  注：破菌效率随着液体体积的增加而增加，液体体积达到100ul时开始达到大破菌效率。

  附：陶瓷珠回收，以下是方法：

      1、将含陶瓷珠的EP管，放置在大烧杯中，用自来水中浸泡2－3天。

      2、用镊子将陶瓷珠和细胞碎片等全部抖落到烧杯中。静置待玻璃珠沉淀后，轻轻将上面悬浮的细胞碎片倒掉，在加水重悬陶瓷珠。

      3、重复步骤2，4－5次直到所有的细胞碎片都去除干净。

      4、加入适量的浓硝酸（将陶瓷珠全部覆盖即可），浸泡过夜。

      5、去离子水洗三次，置烘箱中干燥即可。